​特殊染色(一)

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发表时间:2018-03-07 14:30

赫贝学堂开讲啦!一提到病理检测我们首先想到的就是HE染色,但HE只是常规的病理检查,其它特殊病理检查还包括特殊染色、免疫组化、原位杂交、TUNEL等手段。特殊染色技术,可以弥补免疫组织化学技术以及原位杂交技术的不足,并能广泛应用于病理诊断和病理组织学研究中。今天我们就来聊一聊常用的特殊染色技术应用

PAS染色〔糖元染色〕

【原理】

PAS反应是经典的组织化学方法,用来显示组织细胞中的多糖或糖蛋白。含有乙二醇基的糖类,在过碘酸的作用下,经氧化而产生的双醛基,醛基进而与亚硫酸品红(Schiff试剂)结合,使无色液体变成紫红色染料,并沉着于含有多糖或糖蛋白的细胞或组织结构上。

【结果】

糖原和粘蛋白呈紫红色,细胞核染蓝色,霉菌也呈紫红色。

【临床诊断】

1)肝及心肌糖原沉着症的诊断:糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。

2)糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。

3)骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断:此瘤 80%细胞内有较多糖原,糖原染色为阳性,所以糖原染色为阳性(大多数细胞)可以协助诊断。

4)间皮瘤或滑膜肉瘤与其它癌的鉴别:前者分泌含透明质酸的粘液,糖原染色为阳性,但透明质酸酶消化后即呈阴性反应,如有此染色特点,即可有助于诊断滑膜肉瘤或间皮瘤而不是癌。

Masson三色染色

【原理】

又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。与阴离子染料的大小和组织的渗透有关 ,分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构密度、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。

主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

【结果】

胶原纤维呈蓝色,胞质、肌纤维、红细胞呈红色

【临床诊断】

1)器官硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。

2)瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。

3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。

Van Gieson苦味酸和酸性品红法

【原理】

又称范吉森氏三硝基酚与酸性复红溶液。使结缔组织着色的染剂,含有酸性变红和三硝基酚的水溶液。用于区别胶原纤维和肌纤维。

【结果】

胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。

【临床诊断】

1)器官硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。

2)瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。

3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。

网状纤维染色

【原理】

氨银液被组织吸附与组织中的蛋白结合,经甲醛还原成黑色的金属银沉积于组织内及表面。用氯化金调色后,再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐,从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来。这种技术对于显示网状纤维被认为是十分可靠和广泛使用的方法,它不但能够区别网状纤维和胶原纤维,而且可显示纤细的网状纤维。

【结果】

网状维呈黑色,其他组织呈复染的颜色。  

【临床诊断】

1)癌与肉瘤的鉴别:在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕,或似为团状或巢状的瘤组织,但团巢内仍有破碎的网状纤维,癌显示为明显巢或索状,巢内无网状纤维。

2)骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别:骨基质内有网状纤维,而后者无。

3)炎症细胞与癌细胞的鉴别:在支气管活检中有时挤压较重,一些深染的细胞挤压成团,难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别,炎症细胞不成巢,小细胞癌可有巢状或索状结构。

4)血管性肿瘤的鉴别:有时血管内皮细胞瘤与血管周围细胞瘤常规染色较难鉴别,网状纤维染色,可显示清楚的血管结构,看清肿瘤细胞与血管关系有利于鉴别。内皮细胞性肿瘤,肿瘤位于血管壁的网状支架内,而外周细胞则围绕着血管壁或与之呈放射状排列。

5)肝硬化及慢性肝炎肝细胞碎片状坏死或纤维化的鉴别。

EVG弹性纤维染色

【原理】

弹力纤维中某些部分与 Elastin 染液中间笨二酚的酚基形成氢键而使弹力纤维被染成蓝黑色。改良后的EVG染色法,常常在EVG染色后进行苏木素-伊红染色,此方法对弹力纤维定位更准确。

【结果】

弹性纤维呈蓝黑色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。 

【临床诊断】

1)用于区别正常的动脉和静脉以及观察动脉有病变时血管壁各层的情况,如动脉粥样硬化时的各类变化。

2)用于区别观察各种疾病对弹性纤维的影响及变化,如原发性或继发性高血压可见主动脉弹力纤维增生,老年弹力纤维增多症。心内膜弹力纤维增生症常都可见到弹力纤维断裂,梅毒性主动脉炎和皮肤的环状肉芽肿,动脉粥样硬化均可见到裂解,崩解的弹力纤维。

3)用于弹力纤维性瘤的诊断,弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生,非真性肿瘤。   

综上所述,特殊染色具有试剂简单、操作方便快捷、结果明确、节约时间且价格低廉等优点,同时又能够观察到常规HE染色不能区别的病变,是病理检测中一种不可或缺的技术。

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