赫贝助力 |药理学研究细胞生物学实验中常用来固定不变神经元或细胞器方法是什么

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发表时间:2023-07-12 10:24


神经元离心分离方法有:adsorption(范德华力);covalentbonding(共价结合);crosslinking(交联);entrapment(包埋)、encapsulation(微胶囊)。现在对那几种做详细分析。
一、离子交换法
1,原理
利用形式和细胞表面所带电荷的静电引力(vanderwallsforces),使神经元范德华力于形式上。离子交换法可分为范德华力和离子吸附两种。该法操作简单,离心分离过程对细胞活性影响小。
2,媒介的材料
采取离子交换法固定不变神经元,的载体主要是有:硅藻土、木宵、多孔玻璃、活性碳纤维、
多孔陶瓷、阳离子交换树脂和等。塑
3,影响范德华力离心分离这些因素
(1)z-电势差
(2)细胞的类型及植物细胞壁的组成
(3)媒介的性质
(4)ph
二、共价结
利用细胞表面人的反应基团(如氨基、巯基、羟基、巯基、咪唑基)与活化的无机或有机形式响应,形成共价键将神经元固定不变。用该法制备的离心分离神经元一般为
三、交联法
利用双功能或多功能试剂与细胞表面人的反应基团(如氨基、巯基、羟基、巯基、咪唑基)响应,从而使神经元固定不变。常用的交联剂包括:戊二醛、甲苯二异氰酸酯、双重氮联苯胺。
由于交联试剂的毒性,这种办法具有一定的优越性。
四、包埋法
包埋法是神经元离心分离最有效的方法。包埋法大致分为:
1,微胶囊法:利用半透性聚合物薄膜将神经元包裹起来,形成微型胶囊;
2,凝胶包埋法:是在无菌室环境里,将生物细胞和胶溶液粉末混合,随后再经过一定的塑料造粒处理,形成直径为1-4mm的胶粒。
常用的包埋剂为:聚丙烯酰胺、琼脂、海藻酸、结冷胶、二聚酯材料、三聚酯材料、魔芋胶等。
五、离心分离方法的比较
离子交换法:条件温和、方法操作简单、形式可再生燃料。但操作稳定性差。
共价法:操作性能好。由于试剂的毒性,易产生神经元的污染。
交联法:可得到高细胞浓度,但抗弯度低,难以再生,不比较适合真正使用。
包埋法:细胞和形式间自由自在,离心分离后,神经元依旧保持更高朝气。但这类方法也适用于大分子底物。

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