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磁珠分选细胞注意事项51
发表时间：2014-12-16 14:47 磁珠分选细胞注意事项 1、待分选细胞中如有贴壁细胞，建议在分选前先贴壁培养去除，或者提高EDTA浓度。 2、抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合。因而分选前去除死细胞。 3、新鲜分离骨髓细胞，先用胶原酶、DNA酶、胰酶联合消化，可使细胞团块解聚，从而提高分离效率。 4、上分离柱前，充分振荡，混悬细胞，打散细胞团块。 5、用分离柱分选，应用真空抽滤水，减少水中气泡，使分离柱不被气泡阻滞。 6、细胞悬液加入分离柱中时，应将滴管伸至底壁后加入，避免将细悬液沿管壁流入，使管壁残流末分选细胞，以致后继洗柱过程中，因疏忽末被洗下，最后导致纯度不高。洗柱时，应在前次液体充分流尽后，再加洗液。 7、分选细胞量应根据说明书控制，不超量。 8、孵育时间和温度应按说明书进行，延长孵育时间、提高温度会增加非特异结合。 9、先用抗体阻断Fc受体，可降低非特异性结合。 |
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